ТРАНСМЕМБРАННЫЙ ГУМОРАЛЬНЫЙ ИНБРИДИНГ

А.А. Лубяко, В.И. Кирпатовский

Научный клинический центр нейроэндокринной трансплантологии (Москва)

Среди способов немедикаментозного лечения (коррекции) острой или хронической форм органной и/или полиорганной дисфункции, сопровождающей подавляющее большинство заболеваний внутренних органов и их систем, особое место занимают методы так называемой органотерапии

Среди способов немедикаментозного лечения (коррекции) острой или хронической форм органной и/или полиорганной дисфункции, сопровождающей подавляющее большинство заболеваний внутренних органов и их систем, особое место занимают методы так называемой органотерапии [1],[2],[3]. По определению, это понятие объединяет способы, использующие биологический материал, приготовленный из органов и тканей животного происхождения или собственно внутренние органы, ткани или клетки животных или человека, в качестве лекарственных препаратов (вытяжек, инкретов, сублиматов и т.д.) [4] или средств для заместительной органотерапии методами трансплантации [5].

В последние годы исследователи и клиницисты стали всё чаще обращаться к консервативным методам органотерапии, как универсальному и очень чуткому инструменту, способному через механизмы возбуждения защитно-физиологических реакций организма инициировать восстановление утраченной или прогрессивно утрачиваемой функции того или иного органа, ткани или их системы за счёт собственных резервов больного организма5. Более того, строгая избирательность методов органотерапии, детерминированная генетической сцепленностью факторов видовой, внутривидовой и тканевой специфичности [6],[7],[8],[9], позволяет с абсолютной точностью подействовать на избранную врачом мишень (орган, ткань).

Вместе с тем, существуют заболевания, патогенез которых носит генерализованный характер, включающий в себя весь каскад нарушений нейрогуморальной и метаболической регуляции, где очень трудно, а чаще, практически невозможно установить, с поражения какого органа или какой ткани эта болезнь началась.

К таким болезням можно отнести моче- и желчно-каменную болезнь, атеросклероз, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, гранулематоз, амилоидоз, миокардиопатии, подагру, васкулит, артериит и многие, многие другие. В этих случаях, известные сегодня способы органотерапии видятся мало перспективными, поскольку главным условием их эффективности является правильная диагностика и точный выбор органа-мишени, на который надо подействовать.

К сожалению, для такого рода заболеваний недостаточно эффективны и традиционные способы медикаментозной терапии [10]. Чаще всего они носят симптоматический или общеукрепляющий характер и не всегда могут восстановить качество жизни пациента.

Между тем, если в основу принципов коррекции таких заболеваний положить генеральную концепцию органотерапии, то для такой коррекции, остаётся правильно найти мишень5. Если же мишенью вынуждена быть избранной вся система нейрогуморального регулирования метаболических процессов, то для кратковременной экстракорпоральной перфузии, которую технологически подразумевают методы органотерапии, должен быть избран целостный организм здорового донора, в котором сохранны все нормы защитно-физиологических реакций, обеспеченных стабильностью нормальных инкреторных отношений его органов и тканей [11]. В этом случае, можно предположить, что восстановление норм инктреторных отношений, которое теоретически должны обеспечить регуляторные системы донора, позволит через механизмы возбуждения защитно-физиологических реакций организма восстановить изменённый баланс в обмене веществ реципиента, «разорвав основное звено в порочных кругах» [12] патологического процесса.

Цель настоящей работы: разработать способ, устройство и медицинскую технологию для восстановления норм инкреторных отношений органов и тканей в общем балансе обмена веществ направленным возбуждением регуляторных систем в организме реципиента.

Для этого, нам представлялось необходимым решить следующие задачи:

1. разработать устройство для осуществления гуморального инбридинга в эксперименте на животных;

2. изучить возможности и эффекты гуморального инбридинга;

3. разработать новую медицинскую технологию, позволяющую применить способ трансмембранного гуморального инбридинга для коррекции (лечения) патологических состояний, характеризующихся тотальным нарушением обмена веществ;

4. испытать эффективность гуморального инбридинга для лечения хронической дисфункции печени, мочекаменной болезни и хронического простатита.

Материал и методы исследования

Работа выполнена в 47 экспериментах на 52 беспородных собаках-самцах массой 15-20 кг и 25 кроликах-самцах массой 2,5-3,0 кг. Распределение экспериментального материала представлено в таблице № 1.

Таблица № 1. Распределение экспериментального материала по сериям

 Моделирование заболевания предстательной железы (5 животных)

Хронический простатит моделировали по методике, разработанной в НИИ урологии Росздрава РФ (директор – академик РАМН, профессор Н.А. Лапаткин). Для этого в условиях тиопенталового наркоза обнажали предстательную железы и в её паренхиму пункционно вводили культуру микроорганизмов (кишечная палочка в титре 106 колониеобразующих единиц в 1 мл), полученную в Лаборатории микробиологии НИИ урологии Росздрава РФ. Рану послойно ушивали. В послеоперационном периоде животные получали заведомо низкие дозы антибиотиков, которые не позволяли развиться нагноительному процессу, но и не избавляли их от инфекции.

После периода острого воспаления, заболевание переходило в хроническую форму, что проявлялось в стойкой массивной лейкоцитурии (от 80-90 лейкоцитов в поле зрения до сплошного покрытия всех полей зрения). При бактериологическом исследовании мочи у всех животных была выявлена кишечная палочка в титре 106-108 колониеообразующих единиц на 1 мл. У одной собаки была выявлена ассоциация кишечной палочки и протея (108 колониеобразующих единиц на 1 мл). У двух собак при рентгенологическом исследовании выявили полость в ткани предстательной железы, образовавшуюся в результате абсцедирования и самопроизвольного вскрытия абсцесса в мочеиспускательный канал. При повторных обследованиях, проведённых через 1 и 2 месяца после операции были констатированы все признаки хронического простатита с характерными изменениями при рентгеновском исследовании и исследовании анализов мочи.

Моделирование мочекаменной болезни (5 животных)

У пяти кроликов моделировали нарушения метаболизма, характерные для мочекаменной болезни, для этого в течение 2 недель животным в питьевую воду добавляли этиленгликоль в концентрации 0,75%. Обследование показало двукратное  увеличение экскреции оксалатов (c 13,7±0,7 мг/ммоль креатинина мочи до 26±1,5 мг/ммоль креатинина мочи) и кальция (с 1,96±0,02 ммоль/ммоль креатинина до 3,01±0,06 ммоль/ммоль креатинина) с мочой, а также повышение содержания кристаллов солей в мочевом осадке (в основном кристаллы трипельфосфатов и оксалатов).

Модель хронической дисфункции печени (4 животных)

Для избрания модели хронической дисфункции печени, было принято решение обследовать животных, находящихся более 2-3 лет в лабораторном виварии НИИ урологии Росздрава РФ, ранее оперированных в хроническом эксперименте на органах мочеполовой системы. У четырёх собак, которым неоднократно выполняли такие операции и у которых имелись признаки хронической инфекции мочевых путей (в анализах мочи – стойкая лейкоцитурия), выявили хроническую дисфункцию печени, проявляющуюся в стойком повышении активности трансаминаз (АСТ, АЛТ) в сыворотке крови (АСТ- 41-110 ед. у всех 4 собак, АЛТ – 48-64 ед. у 2 из 4 собак).

Модель перекрёстного кровообращения (10 животных)

В режиме регулируемой по объёму перфузии производили экстракорпоральное объединение потоков крови реципиента и донора (животное-реципиент ↔ животное-донор) с помошью перфузионного устройства, состоящего из двух роликовых насосов, четырёх стерильных магистралей, снабжённых четырьмя стерильными катетерами, обеспечивающими активный забор венозной крови из бедренной вены реципиента и направление её в бедренную вену донора, а также обеспечивающими активный забор венозной крови из бедренной вены донора и её направление в бедренную вену реципиента (рисунок 1). Общее время перфузии = 45 минут. Объёмная скорость перфузии = 80±9 мл/мин.

Рисунок 1.

Модель перекрёстного кровообращения

Модель встречного плазмообмена (10 животных)

В режиме возвратной перфузии производили экстракорпоральное объединение потоков плазмы крови реципиента и донора (животное-реципиент ↔ животное-донор), осуществляемое в известной стерильной плазмофильтрующей колонке перфузионного устройства, состоящего из двух роликовых насосов, четырёх стерильных магистралей, снабжённых четырьмя стерильными катетерами, обеспечивающими активный забор венозной крови из бедренной вены реципиента, её трансфузию через вышеназванную плазмофильтрующую колонку и возвращение в другую вену реципиента, а также обеспечивающими активный забор венозной крови из бедренной вены донора, её трансфузию через идентичную плазмофильтрующую колонку и возвращение в бедренную вену донора. Отфильтрованную плазму крови реципиента вводили внутривенно донору, а отфильтрованную плазму крови донора вводили внутривенно реципиенту в равных объёмах (рисунок 2). Общее время перфузии составило 45 минут. Объёмная скорость перфузии = 72±15 мл/мин. Объёмная скорость плазмофереза = 40±5 мл/мин в начале процедуры до 5±3 мл/мин в конце процедуры.

Рисунок 2.

Модель встречного плазмообмена (встречный плазмоферез).

Модель гуморального трансмембранного инбридинга (10 животных)

В режиме возвратной перфузии производили экстракорпоральное объединение несмешиваемых потоков крови реципиента и донора (животное-реципиент ↔ животное-донор), разделённых полупроницаемой мембраной, осуществляемое в известной стерильной ультрафильтрующей колонке перфузионного устройства, состоящего из двух роликовых насосов, четырёх стерильных магистралей, снабжённых четырьмя стерильными катетерами, обеспечивающими активный забор венозной крови из бедренной или локтевой вены реципиента, её трансфузию через вышеназванную гемофильтрующую колонку прямым потоком и возвращение в другую вену реципиента, а также обеспечивающими активный забор венозной крови из бедренной или локтевой вены донора, её трансфузию через ту же гемофильтрующую колонку обратным (ретроградным) несмешиваемым потоком, разделённым полупроницаемой мембраной, и её возвращение в локтевую или бедренную вену донора (рисунок 3). Общее время перфузии = 45 минут. Объёмная скорость перфузии = 82±14 мл/мин в начале процедуры до 35±8 мл/мин в конце процедуры.

Рисунок 3.

Модель гуморального трансмембранного инбридинга

Протокол исследования

После подключения перфузионного устройства к сосудам донора и реципиента, производили гепаринизацию животных (2,0 мл). Затем снимали зажимы с основных магистралей и начинали перфузию. Через 20 минут дополнительно вводили в аппарат 2,0 мл гепарина. После завершения перфузии аппарат выключали, последовательно удаляя катетеры из вен донора и реципиента. Кровь из магистралей перфузионного устройства возвращали животным.

Забор проб крови для исследований осуществляли перед началом исполнения процедуры после катетеризации сосудов на этапе готовности перфузионного устройства. Последующие пробы венозной крови осуществляли через 1 час после её завершения и на 1, 7, 30 и 60 сутки после операции.

При работе с животными с патологией предстательной железы дополнительно исследовали мочу и проводили рентгенологическое исследование простаты.

Клинические анализы мочи, общий и биохимический анализы крови рентгенологические и бактериологические исследования проводили в специализированных лабораториях НИИ урологии Росздрава РФ (директор – академик РАМН, профессор Н.А. Лопаткин).

 Полученные результаты

Перекрёстное кровообращение. Исследование выполнено в 5 опытах на 10 беспородных собаках массой 15-20 кг (таблица 1). В течение первого часа, т.е. во время и в первые минуты после исполнения процедуры состав крови животных практически не изменялся (эритроциты, лейкоциты, гематокрит), недостоверно снижалось содержание тромбоцитов (p>0,05) при некоторой тенденции к падению гемоглобина (p>0,05), гематокрит оставался устойчивым (рисунок 4).

Рисунок 4.

Морфология крови до и после перекрёстного кровообращения

(на оси ординат количество клеток и их соотношение, на оси абсцисс – этап исследования)

В течение первых суток картина крови незначительно изменялась. Было отмечено продолжающееся падение содержания тромбоцитов (p<0,05), постепенное восстановление гемоглобина при стабильных показателях гематокрита, что можно трактовать в пользу корректности соблюдения объёмных режимов произведённой процедуры. Вместе с тем, в этот период времени был зарегистрирован существенный (более, чем в 2 раза) подъём содержания лейкоцитов (p<0,01), который оставался высоким вплоть до 7 суток после перфузии и нормализовался только к 30 суткам (p<0,01). В это же время, т.е. в период между 1 и 7 сутками наблюдения было отмечено резкое увеличение (p<0,05) и последующая нормализация содержания тромбоцитов (p<0,05), типичное для методики исполнения перекрёстного кровообращения, как компенсаторной реакции на кровосмешение [13],[14].

По состоянию белой крови (рисунок 5) было отмечено, что в течение первого часа, т.е. во время и в первые минуты после исполнения процедуры её состав практически не изменялся: недостоверно снижалось содержание лимфоцитов (p>0,05), моноцитов (p>0,05) и палочкоядерных нейтрофилов(p>0,05) при некоторой тенденции к увеличению содержания сегментоядерных нейтрофилов (p>0,05) и стабильности СОЭ.

Рисунок 5.

 Клетки белой крови до и после перекрёстного кровообращения

(на оси ординат количество клеток и СОЭ, на оси абсцисс – этап исследования)

В течение первых суток картина крови оставалась неизменной. Продолжалось падение содержания лимфоцитов (p<0,05) и нарастание сегментоядерных нейтрофилов (p<0,05). Картина изменялась к 7 суткам исследования: на фоне нормализации нейтрофилов, было выявлено резкое нарастание лимфоцитоза (~в 3 раза, p<0,01). К 7 суткам все показатели белой крови восстанавливались до уровня нормальных.

Исследование биохимических показателей крови (рисунок 6) не выявило существенных изменений с их стороны на исполнение процедуры перекрёстного кровообращения. Содержание мочевины, креатинина и билирубина оставались стабильными в течение всего периода наблюдений. Исключение, пожалуй, составила активность трансаминаз, которая существенно снижалась к первому часу после исполнения процедуры для АСТ (p<0,03), а для АЛТ (p<0,05) к 1 суткам. Однако, это снижение можно трактовать как нормализацию исходных показателей их активности. Последующие же колебания этих показателей были недостоверными и находились в пределах нормы.

Рисунок 6.

Некоторые биохимические показатели плазмы крови до и после перекрёстного кровообращения

(на оси ординат - показатель, на оси абсцисс – этап исследования)

Встречный плазмообмен. Исследование выполнено в 10 опытах на 10 беспородных собаках массой 15-20 кг и 10 кроликах массой 2,5-3,0 кг (таблица 1). В течение первого часа, т.е. во время и в первые минуты после исполнения процедуры состав крови животных практически не изменялся (эритроциты, лейкоциты, гематокрит), недостоверно росло содержание тромбоцитов (p>0,05) при некоторой тенденции к падению гемоглобина (p>0,05), гематокрит оставался устойчивым (рисунок 7).

Рисунок 7.

Морфология крови до и после встречного плазмофереза

(на оси ординат количество клеток и их соотношение, на оси абсцисс – этап исследования)

В течение первых суток картина крови изменялась. Было отмечено резкое (более, чем в 2 раза) падение содержания тромбоцитов (p<0,05), постепенное восстановление гемоглобина при стабильных показателях гематокрита, что также, как в предыдущей серии экспериментов можно трактовать в пользу корректности соблюдения объёмных режимов произведённой перфузии. Однако, в отличие от предыдущей серии опытов (перекрёстное кровообращение) увеличение содержания лейкоцитов было выявлено только к 1 суткам исследования, при этом лейкоцитоз был более выражен (почти в 3 раза, p<0,005) и не так долго оставался высоким, нормализуясь к 7 суткам (p<0,01).

По состоянию белой крови (рисунок 8) были выявлены некоторые отличия от результатов, полученных при исполнении процедуры перекрёстного кровообращения. В течение первого часа, т.е. во время и в первые минуты после исполнения процедуры снижение содержания лимфоцитов было достоверным (p<0,05), увеличение содержания сегментоядерных нейтрофилов чуть более тенденциозным (p>0,05), а - моноцитов (p>0,05) и палочкоядерных нейтрофилов (p>0,05) незначительно нарастало.

Рисунок 8.

Клетки белой крови до и после встречного плазмофереза

(на оси ординат количество клеток и СОЭ, на оси абсцисс – этап исследования)

В течение первых суток картина крови также оставалась неизменной: содержание лимфоцитов оставалось низким по отношению к исходным значениям (p<0,05), а сегментоядерных нейтрофилов по-прежнему имело тенденцию к нарастанию (p<0,05). Как и в предыдущей серии опытов, картина изменялась к 7 суткам исследования: на фоне нормализации содержания нейтрофилов, было выявлено резкое нарастание количества лимфоцитов (более, чем в 3 раза, p<0,01), но абсолютное их содержание было на уровне нормального (p>0,05). Остальные же показатели белой крови к этому времени восстанавливались до нормальных значений, только показатель СОЭ был завышенным и составлял 10,5±2,0 мм.

Исследование биохимических показателей крови (рисунок 9) не выявило существенных изменений с их стороны на исполнение процедуры встречного плазмообмена и они были идентичны таковым при перекрёстном кровообращении. Содержание мочевины, креатинина и билирубина оставались стабильными в течение всего периода наблюдений. Исключение, пожалуй, составила активность трансаминаз, которая недостоверно снижалась к первому часу после исполнения процедуры: для АСТ (30,2±1,2 ед.; p>0,05), а для АЛТ (14,2±2 ед.; p>0,05) к 1 суткам. Однако, это снижение можно трактовать как нормализацию исходных показателей активности трансаминаз. Последующие же колебания были недостоверными и находились в пределах нормы.

Рисунок 9.

Некоторые биохимические показатели плазмы крови до и после встречного плазмофереза

(на оси ординат - показатель, на оси абсцисс – этап исследования)

Трансмембранный гуморальный инбридинг. Исследование выполнено в 5 опытах на 10 беспородных собаках массой 15-20 кг (таблица 1).

 В течение первого часа, т.е. во время и в первые минуты после исполнения процедуры состав крови животных практически не изменялся (эритроциты, лейкоциты, гематокрит), недостоверно увеличивалось содержание тромбоцитов (p>0,05) при некоторой тенденции к падению гемоглобина (p>0,05). Гематокрит оставался устойчивым (рисунок 10).

Рисунок 10.

Морфология крови до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат количество клеток и их соотношение, на оси абсцисс – этап исследования)

В течение первых суток картина крови изменялась. Было отмечено достоверное (~ в 2 раза) падение содержания тромбоцитов (с 319±24 до 158±26; p<0,05), постепенное восстановление гемоглобина при стабильных показателях гематокрита, что также, как в предыдущих сериях экспериментов можно трактовать в пользу корректности соблюдения объёмных режимов произведённой перфузии.

Также как в предыдущей серии опытов (встречный плазмообмен) увеличение содержания лейкоцитов было выявлено только к 1 суткам исследования, при этом лейкоцитоз был также выражен (почти в 3 раза, p<0,005) и оставался высоким до 7 суток (p<0,01). В первые сутки также было выявлено резкое падение (более, чем в 2 раза) содержания тромбоцитов и нормализация их количества к 7 суткам исследования.

По состоянию белой крови (рисунок 11) были выявлены некоторые отличия от результатов, полученных при исполнении процедуры перекрёстного кровообращения, но схожие с таковыми при исполнении встречного плазмообмена, что указывает на идентичность технологических особенностей названных методик.

Рисунок 11.

Клетки белой крови до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат количество клеток и СОЭ, на оси абсцисс – этап исследования)

Так в течение первого часа, т.е. во время и в первые минуты после исполнения процедуры снижение содержания лимфоцитов достоверно снижалось (p<0,05), а увеличение содержания сегментоядерных нейтрофилов было чуть более тенденциозным (p>0,05). Содержание же моноцитов незначительно падало (p>0,05), а палочкоядерных нейтрофилов недостоверно нарастало (p>0,05).

В течение первых суток картина крови оставалась неизменной: продолжалось восстановление содержания лимфоцитов, хотя оно и оставалось низким по отношению к исходным значениям (p<0,05), а сегментоядерных нейтрофилов по-прежнему было высоким (p<0,05), нормализуясь к 7 суткам исследования (p>0,05). Остальные показатели белой крови к этому времени также восстанавливались до нормальных значений.

Исследование биохимических показателей крови (рисунок 12) не выявило существенных изменений с их стороны на исполнение процедуры и они были идентичны таковым при перекрёстном кровообращении и встречном плазмоферезе. Содержание мочевины, креатинина и билирубина оставались стабильными в течение всего периода наблюдений. Активность АСТ, которая достоверно снижалась к первому часу после исполнения процедуры (40,9±1,2 ед.; p<0,05) и достигала нормальных значений к 1 суткам (10,1±2 ед.; p<0,03). Однако, это снижение мы трактовали как нормализацию исходных показателей её активности. Последующие же колебания были недостоверными и находились в пределах нормы.

Рисунок 12.

Некоторые биохимические показатели плазмы крови до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат - показатель, на оси абсцисс – этап исследования)

Гуморальный трансмембранный инбридинг при хронической дисфункции печени. Исследование выполнено в 4 опытах на 8 беспородных собаках массой 15-20 кг (рисунки 13-15, таблица 2). Реципиентов отбирали из числа животных, которым ранее неоднократно выполняли операции на органах мочеполовой системы и у которых имелись все признаки хронической инфекции мочевых путей (в анализах мочи – стойкая лейкоцитурия). У четырёх из них была выявлена хроническая дисфункция печени, проявляющаяся в стойком повышении активности трансаминаз в сыворотке крови (АСТ- 41-110 ед. у всех 4 собак, АЛТ – 48-64 ед. у 2 из 4 собак). Всем собакам была проведена процедура трансмембранного гуморального инбридинга.

В течение первого часа, т.е. во время и в сразу после исполнения процедуры состав крови животных оставался стабильным: недостоверно увеличивалось содержание тромбоцитов (p>0,05) при некоторой тенденции к падению гемоглобина (p>0,05), гематокрит, как в контрольных сериях, оставался устойчивым (рисунок 13).

Рисунок 13.

Морфология крови животных, у которых была констатирована хроническая дисфункция печени до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат количество клеток и их соотношение, на оси абсцисс – этап исследования)

В течение первых суток картина крови изменялась. Было отмечено достоверное падение содержания тромбоцитов (с 256,67±28 до 164,67±3; p<0,03), постепенное восстановление гемоглобина при стабильных показателях гематокрита, что также, как в предыдущих сериях экспериментов можно трактовать в пользу корректности соблюдения объёмных режимов произведённой перфузии.

Также как в других контрольных сериях опытов увеличение содержания лейкоцитов было выявлено только к 1 суткам исследования, при этом лейкоцитоз был также ярко выражен (почти в 3 раза, p<0,005) и оставался высоким до 7 суток (p<0,01). В первые же сутки было выявлено типичное для всех серий опытов падение (более, чем в 2 раза) содержания тромбоцитов и нормализация их количества к 7 суткам наблюдения.

По состоянию белой крови (рисунок 14) были выявлены некоторые отличия от результатов, полученных при исполнении процедуры перекрёстного кровообращения, но схожие с таковыми при исполнении встречного плазмообмена. Это указывает на идентичность технологических особенностей названных методик.

Рисунок 14.

Клетки белой крови и СОЭ животных, у которых была констатирована хроническая дисфункция печени до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат количество клеток и СОЭ, на оси абсцисс – этап исследования)

Так в течение первого часа, т.е. во время и в первые минуты после исполнения процедуры снижение содержания лимфоцитов достоверно снижалось (p<0,05), а увеличение содержания сегментоядерных нейтрофилов было чуть более активным (p>0,05). Содержание моноцитов незначительно падало (p>0,05), а палочкоядерных нейтрофилов (p>0,05) недостоверно нарастало.

В течение первых суток картина крови оставалась неизменной: продолжалось восстановление содержания лимфоцитов, хотя оно оставалось низким по отношению к исходным значениям (p<0,05). Количество сегментоядерных нейтрофилов по-прежнему было высоким (p<0,05), нормализуясь к 7 суткам исследования (p>0,05). Остальные показатели белой крови к этому времени восстанавливались до нормальных значений.

Биохимические исследования (рисунок 15) показали, что к 1-ому часу после исполнения процедуры гуморального трансмембранного инбридинга у животных существенно падала активность трансаминаз: АСТ с 64,8±12,1 до 28,4±8 ед. (p<0,05), а АЛТ с 43±12 до 15,5±6 ед. (p<0,05). Однако, к 1-ым суткам наблюдения было отмечено достоверное увеличение активности АСТ до 43,77±13 ед (p<0,05) и продолжающееся падение АЛТ до 14,17±4 ед. (p>0,05).

Рисунок 15.

Некоторые биохимические показатели плазмы крови животных, у которых была констатирована хроническая дисфункция печени до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат - показатель, на оси абсцисс – этап исследования)

Через 7 дней средние статистические значения обоих ферментов были в пределах нормы (15,43-18,97 ед.), хотя у одной собаки активность АСТ оставалась на верхней границе нормы (41 ед.).

Вместе с тем, через  14, 30 и 60 дней у всех животных отмечались стойко нормальные значения активности обеих трансаминаз (АСТ, АЛТ) в сыворотке крови (таблица № 2).

Таблица 2. Содержание трансаминаз в сыворотке крови животных с хронической дисфункцией печени

Данный пример иллюстрирует эффективность применения способа гуморального трансмембранного инбридинга при хронической дисфункции печени. Его исполнение привело к полной и стойкой нормализации ранее нарушенных показателей крови и, соответственно, - состояния гепатоцитов.

Состояние животных-доноров при лечении хронической дисфункции печени. Нам представлялось очень важным изучить реакции животных-доноров, т.е. состояние показателей крови здоровых животных, которые приняли участие в лечебном процессе.

В течение первого часа, т.е. во время и в сразу после исполнения процедуры, состав крови животных-доноров практически не изменялся: недостоверно увеличивалось содержание тромбоцитов (p>0,05) при некоторой тенденции к падению гемоглобина (137±12; p>0,05). Гематокрит, как и у больных собак, оставался устойчивым (рисунок 16).

Рисунок 16.

Морфология крови животных-доноров до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат количество клеток и их соотношение, на оси абсцисс – этап исследования)

В течение первых суток картина крови изменялась также как и у больных собак: содержание тромбоцитов падало (с 250±28 до 91±3; p<0,005), постепенно восстанавливалось содержание гемоглобина при стабильных показателях гематокрита. Также как и у больных животных увеличение содержания лейкоцитов было выявлено только к 1 суткам исследования, при этом лейкоцитоз был также ярко выражен (почти в 3 раза, p<0,005) и оставался высоким до 7 суток (p<0,01), нормализуясь к 30 суткам наблюдения (p<0,05).

В первые сутки наблюдения было выявлено такое же резкое падение (более, чем в 2 раза) содержания тромбоцитов и нормализация их количества к 7 суткам, что было оценено как аутентичная реакция на исполнение процедуры гуморального трансмембранного инбридинга и механическую травму крови. К 30-ым суткам наблюдения все показатели были в пределах нормы.

Реакции белой крови (рисунок 17) были однотипными как в группе больных животных, так и в группе животных-доноров. Также как у больных животных, у животных-доноров в течение первого часа, т.е. во время и в первые минуты после исполнения процедуры, было выявлено существенное падение содержания лимфоцитов с  24,5±4 до 8,5±2 (p<0,03) и увеличение содержания сегментоядерных нейтрофилов с 56±3 до 69,5±4 (p>0,05). Содержание же моноцитов, в отличие от такового у больных животных, не падало, а недостоверно нарастало (p>0,05). Увеличение содержания палочкоядерных нейтрофилов было таким же (p>0,05).

Рисунок 17.

Клетки белой крови и СОЭ животных-доноров до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат количество клеток и их соотношение, на оси абсцисс – этап исследования)

В течение первых суток картина крови была аналогичной: содержание лимфоцитов оставалось низким (p<0,05), а сегментоядерных нейтрофилов по-прежнему было высоким (p<0,05), нормализуясь к 7 суткам исследования (p<0,05). Остальные показатели белой крови к этому времени также восстанавливались до нормальных значений.        Вместе с тем, динамика биохимических показателей крови животных-доноров имела существенные отличия (таблица 3, рисунок 18).

Таблица 3.

Содержание трансаминаз в сыворотке крови животных-доноров после исполнения гуморального трансмембранного инбридинга больным животным с хронической дисфункцией печени

Рисунок 18.

Некоторые биохимические показатели плазмы крови животных-доноров

до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат - показатель, на оси абсцисс – этап исследования)

Исследования показали, что к 1-ому часу после исполнения процедуры гуморального трансмембранного инбридинга у животных-доноров существенно нарастала активность АЛТ с 15,3±2 ед. до 33,5±6 ед. (p,0<05) на фоне относительно спокойной активности АСТ (14,8±3 ед. - 12,7±2 ед.), что указывало на срочную реакцию печени животного в ответ на контакт плазмы крови больного животного с плазмой крови донора. Однако, к 1-ым суткам наблюдения активность АЛТ нормализовалась, а активность АСТ начала нарастать (с 12,7±2 ед. до 24,6±4 ед. p,0<05). Это ясно указывало на тот факт, что организм донора, получивший избыточное количество веществ, попавших в кровь от больных животных, продолжал «бороться» с ними силами своих защитно-физиологических реакций, отягощая печень избыточной нагрузкой, которая была успешно разрешена только к 60-му дню наблюдения (таблица 3). Именно тгда было констатировано, что показатели активности трансаминаз в плазме крови животных-доноров нормализовалось полностью.

Данный пример ярко иллюстрирует, что достигнутая эффективность применения способа гуморального трансмембранного инбридинга животным с хронической дисфункцией печени не безразлична для животных-доноров. И хотя исполнение процедуры гуморального трансмембранного инбридинга привело к полной и стойкой нормализации ранее нарушенных показателей крови у всех участников перфузии, обстоятельства возникших рисков для донора были существенными.

Трансмембранный гуморальный инбридинг при хроническом простатите. Исследование выполнено в 6 опытах на 12 беспородных собаках массой 15-20 кг (рисунок 19-21, таблица 4, 5), у которых моделировали хронический простатит путем введения взвеси микроорганизмов (кишечная палочка в титре 106 колониеобразующих единиц в 1 мл) в ткань предстательной железы. После периода острого воспаления, заболевание переходило в хроническую форму, что проявлялось в стойкой массивной лейкоцитурии (от 80-90 лейкоцитов в поле зрения до сплошного покрытия всех полей зрения), а также выявления кишечной палочки при бактериологическом исследовании мочи (в титре 106-108 колониеообразующих единиц в 1 мл мочи). У 1 собаки выявилась ассоциация кишечной палочки и протея (108 колониеобразующих единиц в 1 мл. У 2 собак при рентгенологическом исследовании выявили полость в ткани предстательной железы, образовавшуюся в результате абсцедирования ткани и самопроизвольного вскрытия абсцесса в мочеиспускательный канал.

Всем собакам провели однократную процедуру трансмембранного гуморального инбридинга. При исследовании мочи через 7 и 14 дней было установлено уменьшение выраженности лейкоцитурии  и бактериурии (таблица № 4).

Таблица 4.

Результаты исследования мочи животных с хроническим простатитом до и после исполнения процедуры гуморального трансмембранного инбридинга

Таблица 5.

Содержание трансаминаз в сыворотке крови животных, больных хронической формой простатита после исполнения гуморального трансмембранного инбридинга

У собаки с ассоциацией кишечной палочки и протея при повторном исследовании через 14 дней протея не обнаружили. Титр кишечной палочки уменьшился с 108 до 104 колониеобразующих единиц в 1 мл мочи. При рентгенологическом исследовании  собак со вскрывшимся абсцессом простаты вывили значительное уменьшение образовавшейся полости.

При обследовании животных через 30 и 60 дней у 3 собак состояние практически не изменилось, а у других 3 животных (с абсцессом простаты) выявили некоторое нарастание симптомов воспаления: количество лейкоцитов в осадке мочи выросло до 80-90 в п/зр. При этом полость абсцесса простаты уменьшилась ещё больше.

Морфологическое исследование крови животных показало, что в течение всего периода наблюдений после исполнения процедуры состав крови животных практически не изменялся (рисунок 19). Не было даже выявлено характрное падение содержания тромбоцитов к 1-ым суткам наблюдения. Они, по всей видимости, оказались у больных животных более устойчивы к механической травме крови.

Рисунок 19.

Морфология крови животных, больных хронической формой простатита

до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат количество клеток и их соотношение, на оси абсцисс – этап исследования)

Некоторые характерные изменения, схожие с изученной ранее динамикой в ответ на исполнения процедуры гуморального трансмембранного инбридинга, были выявлены при изучении состава белой крови животных (рисунок 20). Так был констатирован лейкоцитоз, нараставший к 1-ым суткам наблюдения. При этом, интенсивность его была такой же (~ в 3 раза превышающей нормальные значения; p<0,005), как и во всех предыдущих сериях экспериментов. Устойчивая нормализация количества лейкоцитов крови отмечалось также к 7 суткам наблюдения (p<0,01).

 В первые сутки наблюдения также было отмечено некоторое падение и последующее восстановление содержания тромбоцитов, хотя эти зарегистрированные нами колебания были статистически недостоверны (p>0,05). Остальные клетки крови (рисунок 20) оставались относительно стабильными, а СОЭ низкой в течение всего периода наблюдений.

 Рисунок 20.

Белая кровь животных, больных хронической формой простатита

до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат количество клеток и их соотношение, на оси абсцисс – этап исследования)

Вместе с тем, исследование биохимических показателей плазмы крови (рисунок 21) животных показали, что исполнение гуморального трансмембранного инбридинга, сопровождается несколько иной, чем в предыдущих сериях, динамикой. В частности, это относится к активности трансаминаз. Так активность АСТ через 1 час после процедуры имела некоторую тенденцию к снижению (24,8±4 ед.; p>0,05) и начинала нарастать только начиная с 1-ых суток наблюдения (48±4 ед; p<0,05) вплодь до 7-ых суток включительно (57±6 ед.; p<0,03). Только после этого она начинала падать (37±5 ед. на 30 сутки; p<0,05), оставаясь на верхней границе нормы даже к 60 суткам (28±6 ед.; p>0,05).

Рисунок 21.

Некоторые биохимические показатели плазмы крови животных, больных хронической формой простатита

до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат количество клеток и их соотношение, на оси абсцисс – этап исследования)

Другая трансаминаза - АЛТ уже через 1 час после процедуры достоверно снижалась до 11,8±3 ед. активности (p<0,03) и также, как АСТ начинала нарастать только с 1-ых суток наблюдения (50±6 ед.; p<0,05). К 7-ым же суткам её активность начинала падать (31±4 ед.; p>0,05), а к 30 суткам наблюдения снижалась до 21,0±4 ед. (p<0,05), оставаясь, как и АСТ, на верхней границе нормы даже к 60 суткам наблюдения (19,8±2 ед.; p>0,05).

Состояние животных-доноров при лечении хронического простатита способом гуморального трансмембранного инбридинга. Исследование выполнено на 6 здоровых животных, исполнивших роль доноров при лечении собак, больных хронической формой простатита. (рисунок 22-24, таблица 6, 7). Морфологическое исследование крови животных показало, что в течение всего периода наблюдений после исполнения процедуры состав крови животных практически не изменялся (рисунок 22).

Рисунок 22.

Морфология крови животных-доноров до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат количество клеток и их соотношение, на оси абсцисс – этап исследования)

Некоторые типические изменения, схожие с изученной ранее динамикой в ответ на исполнения процедуры гуморального трансмембранного инбридинга, были выявлены при изучении состава белой крови животных (рисунок 23), но они не были так ярки.

Рисунок 23.

Клетки белой крови и СОЭ животных-доноров до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат количество клеток и их соотношение, на оси абсцисс – этап исследования)

Так был констатирован лейкоцитоз к 1-ым суткам наблюдения (также ~ в 3 раза, p<0,005), который снижался вдвое к 7-ым суткам и нормализовался к 30 суткам наблюдения (p<0,01). В первые сутки также было отмечено падение (~ в 2 раза) и последующее восстановление содержания тромбоцитов к 7 суткам. Остальные клетки крови оставались относительно стабильными в течение всего периода наблюдений, а СОЭ низкой.

Вместе с тем, исследование биохимических показателей плазмы крови животных-доноров показали, что исполнение гуморального трансмембранного инбридинга при лечении животных, больных хронической формой простатита, оказывается не безразличным для доноров (таблица 6, рисунок 24). Они показали, что уже к 1-ому часу после исполнения процедуры гуморального трансмембранного инбридинга у животных-доноров существенно нарастала активность АСТ с 29±6 ед. до 45±2 ед. (p,0<05) на фоне относительно спокойной активности АЛТ (36±12 ед. – 36,5±6 ед.), что указывает на серьёзную нагрузку для печени животного в ответ на действие диффундирующих факторов крови больного животного в кровь животного-донора. Уже к 1-ым суткам наблюдения активность АСТ достигала 66,5±4 ед. (p,0<05), а активность АЛТ - 53,8±12 ед. (p,0<05). При этом активность трансаминаз начала снижаться только к 7-ым суткам наблюдения: АСТ - до  41±5 ед., АЛТ – до 33,0±5 ед. и устойчиво нормализовалась к 30 суткам (АСТ - 16,4±8 ед.; АЛТ – 18,0±2 ед. Характерным признаком серьёзности такой нагрузки стал факт увеличения содержания билирубина в плазме крови (рисунок 24). Его повышение было зарегистрировано начиная с 1-го часа (8,3±2 нмоль/л) после исполнения процедуры и сохранялось вплодь до 1-ых суток наблюдения (8,0±1,8 нмоль/л), когда активность трансаминаз достигала своих «пиковых» значений.

Рисунок 24.

Некоторые биохимические показатели плазмы крови животных-доноров

до и после гуморального трансмембранного инбридинга

(на оси ординат - показатель, на оси абсцисс – этап исследования)

Данный пример иллюстрирует то обстоятельство, что однократное проведение процедуры гуморального трансмембранного инбридинга создаёт достаточно серьёзную нагрузку для печени животных-доноров, но, тем не менее, не является критической, поскольку организм последних адекватно справляется с ней. При этом пик «критичности» приходится на 1-е сутки после исполнения процедуры.

Таблица 6. Содержание трансаминаз в сыворотке крови животных-доноров после исполнения гуморального трансмембранного инбридинга животным, больным хронической формой простатита

Трансмембранный гуморальный инбридинг при мочекаменной болезни. Исследование выполнено в 5 опытах на 10 кроликах массой 2,5-3,0 кг, у которых моделировали нарушения метаболизма, характерные для мочекаменной болезни.

При обследовании этих животных выявили двукратное  увеличение экскреции оксалатов с мочой (c 13,7±0,7 мг/ммоль креатинина мочи до 26±1,5 мг/ммоль креатинина мочи) и кальция с мочой (с 1,96±0,02 ммоль/ммоль креатинина мочи до 3,01±0,06 ммоль/ммоль креатинина мочи), а также повышение содержания кристаллов солей в мочевом осадке (в основном кристаллы трипельфосфатов и оксалатов).

Трем кроликам провели однократную процедуру трансмембранного гуморального инбридинга с использованием здорового кролика-донора, а у 2 животных никаких лечебных мероприятий не применяли.

У нелеченных кроликов метаболические изменения стойко сохранялись. Через 10 дней экскреция оксалатов с мочой составляла 30,6±0,6 мг/ммоль креатинина мочи, а экскреция кальция – 3,62±0,11 ммоль/ммоль креатинина мочи. Через 1 месяц экскреция оксалатов составила 28,3±0,7 мг/ммоль креатинина мочи, а экскреция кальция – 2,88±0,09 ммоль/ммоль креатинина мочи. Все эти показатели были достоверно выше нормальных значений. В осадке мочи по-прежнему определялось большое количество кристаллов солей.

При обследовании кроликов, подвергнутых процедуре трансмембанного гуморального инбридинга через 3 суток обнаружили некоторое усугубление метаболических сдвигов  (экскреция оксалатов возросла до 37,6±0,8 мг/ммоль креатинина мочи, а экскреция кальция – до 4,83 ±0,13 ммоль/ммоль креатинина мочи), однако уже к 7 суткам было зарегистрировано значительное уменьшение метаболических сдвигов: экскреция оксалатов снизилась до 20,7±0,12 мг/ммоль креатинина мочи, а экскреция кальция – до 2,63±0,09 ммоль/ммоль креатинина мочи.

Через 1 месяц показатели еще больше улучшились и приблизились к нормальным значениям. Экскреция оксалатов составила 15,3±0,09 мг/ммоль креатинина мочи. При этом у 2 кроликов этот показатель оказался в пределах нормы, а экскреция кальция нормализовалась у всех 3 животных, составив 1,54±0,05 ммоль/ммоль креатинина мочи. При исследовании осадка мочи обнаружено значительное уменьшение количества кристаллов солей. При обследовании кроликов-доноров все показатели мочи оставались в пределах нормы.

Таким образом, проведение процедуры гуморального трансмембранного инбридинга привело к нормализации метаболических нарушений, характерных для мочекаменной болезни, тогда как без подобного лечения нормализации нарушенных метаболических показателей не происходила, что иллюстрирует достаточно высокую возможность коррекции метаболических нарушений организма с помощью метода гуморального трансмембранного инбридинга.

 Обсуждение полученных результатов

Приступая к анализу полученных результатов, правильно начать с того, что общая концепция органотерапии, как одного из способов немедикаментозной коррекции нарушенной функции (гипо- или гиперфункции) того или иного органа, ткани и/или их системы не является новой. Её корни уходят далеко в историю врачевания и медицины [15],[16],[17],[18],[19],[20]. Однако, как самостоятельное направление органотерапия начала завоёвывать свои позиции только в начале нового тысячелетия, выйдя за рамки экспериментальных и клинических исследований, продолжавшихся с 1974 по 2005 год [21],[22],[23],[24],[25],[26]. Между тем, нельзя сказать, что органотерапия полностью завоевала твёрдые позиции новой или усовершенствованной медицинской технологии, хотя уже отстояла своё право быть отнесённой к высоким медицинским технологиям [27].

Это очень важно, поскольку принципы и сама идеология органотерапии, базируются на возможностях коррекции нарушенной функции органов, тканей и/или их систем через детально изученные и убедительно доказанные механизмы [28],[29],[30],[31],[32],[33] восстановления их функции за счёт собственных внутренних резервов [34]. Безусловно, это оказывается возможным, если поражённый орган, ткань и/или их система имеют остаточный, морфологический субстрат. В этом случае, теория органотерапии позволяет не только надеяться на успех предпринимаемых медицинских действий, связанных с использованием её способов и технологий, но и позволяет ожидать устойчивую реабилитацию утраченной или нивелирования избыточной функции повреждённого болезнью органа, ткани и/или их системы.

Вместе с тем, для уверенности в успехе способов органотерапии принципиально важно твёрдо знать пострадавшее звено, приведшее к существующей патологии. Это не только увеличивает эффективность технологии, это обеспечивает её надёжность и устойчивость ожидаемого эффекта. Не зная «мишень», очень трудно, а по большей части, невозможно произвольно использовать избранный биологический материал. В этом случае, лечение может приобрести форму общеукрепляющего толка или, стало принято называть это теперь, - иммуномодулирующего действия.

Всё вышеизложенное имеет самое прямое отношение к патологиям неясной этиологии, носящим генерализованный характер. Именно поэтому мы избрали в качестве моделей для коррекции (лечения) нижеследующие патологии:

1. мочекаменную болезнь, где этиологическое начало равно может лежать в последствиях инфицирования или травмы мочевыводящих путей, поражениях желудочно-кишечного тракта, половой сферы, эндокринных органов, водно-солевого, кислотно-щёлочного или основного обмена веществ [35],[36],[37]. В любом варианте мочекаменная болезнь – это заболевание системного характера неясной и/или поливалентной этиологии;

2. хроническую форму дисфункции печени, причиной которой может стать громадное количество этиологических начал [38], но мишень очевидна. Другим основанием для избрания этой модели стало то обстоятельство, что изолированная экстракорпоральная перфузия печени как биологического материала в технологиях органотерапии весьма затруднительна [39],[40]. Это связано с большим количеством технических сложностей её забора, консервации и транспортировки [41]. Экстракорпоральная же перфузия изолированных гепатоцитов [42],[43],[44], печени [45],46 или фрагментов печёночной ткани [46],[47], чревата своими сложностями, связанными с морфологическими особенностями органа [48];

3. хронический простатит, который был избран как модель, имеющая не только заведомо известную «мишень», но и очевидную этиологию [49],[50]. Эта модель была избрана, чтобы понять круг возможностей самого метода гуморального трансмембранного инбридинга и насколько эти возможности распространимы на патологии с выраженной локализацией процесса.

Вместе с тем, нам представляется важным акцентировать внимание на механизмах действия органотерапии, а точнее, на их принципиально важных составляющих, проявление которых в настоящем исследование могло бы указать на возможную причастность предлагаемого способа гуморального трансмембранного инбридинга к методам органотерапии. Это:

·  реакции возбуждения систем метаболической регуляции, прямо влияющие на функцию клеток органа-мишени (механизмы специфического действия);

·  механизмы возбуждения системы нейрогуморальной регуляции (механизмы неспецифического действия);

·  механизмы реабилитации нормы внешней функции органа-мишени;

·  механизмы реабилитации инкреторной функции органа-мишени в общем балансе инкреторных отношений органов, тканей и их систем (в общем обмене веществ).

Факт причастности гуморального трансмембранного инбридинга и встречного плазмофереза к методам органотерапии для нас очевиден, поскольку хорошо известный способ аутогемотрансфузии всегда  был одним из древнейших методов органотерапии. Вместе с тем, нам представлялось важным иметь для этого более убедительные доказательства.

Сравнителный анализ полученных результатов показал, что испытанные нами в контрольных сериях экспериментов методы перекрёстного кровообращения, встречного плазмообмена (встречного плазмофереза) и собственно гуморального трансмембранного инбридинга (далее – инбридинг) наделены всеми теми свойствами, которые способны вызвать и вызывают поименованные выше реакции:

1. так из таблиц 7, 8 и 9 следует, что все испытанные нами методы, обеспечивавшие прямой или опосредованный (трансмембранный) контакт крови реципиента и донора указывает на наличие реакции возмущения на этапе завершения процедуры и в ранний послеоперационный период. Она отчётливо проявляется в изменениях активности и соотношений (баланса) активностей трансаминаз (АСТ, АЛТ), как маркеров процессов переаминирования, происходящих в печени, и креатинина, мочевины, биллирубина, указывающих на их эффективность. По этим показателям и их соотношению можно косвенно судить о состоянии неспецифической (типической) составляющей реакции возбуждения процессов метаболического регулирования в общем обмене веществ. В нашем случае, наиболее яркие изменения неспецифической составляющей реакций возбуждения были выявлены через 60 минут при исполнении встречного плазмофереза; менее интенсивными – при исполнении процедуры гуморального трансмембранного инбридинга; и менее всего проявлялись при перекрёстном кровообращении. Вместе с тем, неспецифическая составляющая реакции возмущения достигала своего апогея к 1-ым суткам наблюдения, оставаясь наиболее яркой при встречном плазмоферезе. По интенсивности реакции возбуждения они распределялись следующим образом: за плазмоферезом следовал инбридинг, за ним - перекрёстное кровообращение. Однако, при исполнении инбридинга реакции были устойчивее и продолжались до 7-ых суток наблюдения, в то время как при плазмоферезе и перекрёстном кровообращении к 7-ым суткам они завершались (таблица 6). Это можно объяснить массированностью антигенного воздействия на иммунную систему при полном (перекрёстное кровообращение) или частичном (встречный плазмообмен) кровосмешении, ингибирующим в той или иной степени возможности адаптивных реакций по типу синдрома Фелтона [51].

Таблица 7.

Соотношения некоторых биохимических показателей плазмы крови животных в сравнительном анализе контрольных серий экспериментов

2. Динамика изменений в морфологическом составе крови (таблица 7) и её лейкоцитарной формуле (таблица 8) только подтверждают это обстоятельство (по п.1), поскольку продолжительность клеточных реакций наиболее устойчива при инбридинге, менее устойчива при плазмоферезе и менее всего выражена после перекрёстного кровообращения. Вместе с тем, обращает на себя внимание отсроченность клеточной составляющей реакции возмущения, наиболее ярко проявляющейся к 1-ым суткам наблюдения. Это не только логически иллюстрирует своевременное включение защитно-физиологических реакций в процесс возбуждения, но и может служить характеристикой правильно избранного направления теоретических рассуждений, приписывающих возможности инбридинга, плазмофереза и кровосмешения к идеологии методов органотерапии (именно в этой последовательности), где предпочтение должно быть отдано инбридингу и плазмоферезу (по результатам, полученным к 30-ым и 60-ым суткам наблюдения).

Таблица 8.

Морфологический состав крови животных в сравнительном анализе контрольных серий экспериментов

3. Более того, и это, пожалуй, самое главное, реакции возбуждения систем регулирования метаболических процессов не только оказываются безопасными, что видно по конфигурации относительных и абсолютных величин исследованных параметров крови (биохимических - таблица 7, и морфологических - таблицы 8-9), но и обладают лечебными свойствами направленного типа действия. Это отчётливо видно из результатов, полученных к 7-му, 30-му дню наблюдений в опытных сериях экспериментов (таблицы 10-12). К этому времени изначально разбалансированные (патологические) показатели крови животных, больных хронической дисфункцией печени, нормализовались, а в случае коррекции хронического простатита – значительно улучшались. Это полностью было подтверждено клиникой течения заболевания после исполнения процедуры, а также клиническими исследованиями мочи и рентгенологическими исследованиями предстательной железы. Дополнительное подтверждение вышеизложенного было получено в опытах с коррекцией мочекаменной болезни у кроликов, пролеченных способом гуморального трансмембранного инбридинга, зарекомендовавшего себя с положительной стороны в вышеописанных опытах. Все животные, подвергшиеся однократной процедуре гуморального трансмембранного инбридинга достигли состояния полного выздоровления к 30-60 суткам наблюдения.

Таблица 9.

 Состав белой крови животных в сравнительном анализе контрольных серий экспериментов

Таблица 10.

Соотношения некоторых биохимических показателей плазмы крови в опытных группах животных, пролеченных способом гуморального трансмембранного инбридинга в сравнительном анализе

Таблица 11.

Соотношения клеток крови в опытных группах животных, пролеченных способом гуморального трансмембранного инбридинга в сравнительном анализе

Таблица 12.

Соотношения клеток белой крови в опытных группах животных, пролеченных способом гуморального трансмембранного инбридинга в сравнительном анализе

 4. Это же обстоятельство косвенно подтверждает изначальное предположение, что возможности гуморального трансмембранного инбридинга и встречного плазмофереза в выборе «мишеней» оказываются достаточно точными, а сама процедура отвечает требованиям, предъявленным нами для включения её в перечень способов органотерапии.

Заключение

Таким образом, способы гуморального трансмембранного инбридинга и встречного плазмофереза (встречного плазмообмена) можно охарактеризовать перспективными для лечения (коррекции) состояний, связанных с нарушениями или последствиями нарушений обмена веществ различной этиологии, а сами способы могут быть отнесены к методам органотерапии.

Выводы

1. Прямой и/или опосредованный контакт крови донора с кровью реципиента вызывает развитие характерных ответных реакций (реакций «возмущения») со стороны систем их нейрогуморальной и метаболической регуляции, выраженной в изменении клеточного состава крови и биохимических показателей, характерных для методов органотерапии;

2. Вышеназванные реакции начинают проявляться во время исполнения процедуры, достигая своего максимума к 1-ым и 7-ым суткам, т.е. к срокам, характерным для этапов реализации механизмов срочной и долговременной адаптации;

3. Наиболее ярко реакции «возмущения» регуляторных систем были выявлены при исполнении процедуры встречного плазмообмена (встречного плазмофереза), позволяющего в режиме обратной связи урегулировать инкреторный дисбаланс больного животного;

4. Доминирующую роль в реакциях «возмущения» при исполнении процедуры встречного плазмообмена играют иммунологические процессы, что отчётливо прослеживается в динамике состава белой крови;

5. При исполнении процедуры гуморального трансмембранного инбридинга доминирующую позицию в реакциях «возмущения» занимают защитно-физиологические реакции, связанные с обменом регуляторными белками и пептидами, попадающими в кровь при встречной диффузии через мембрану ультрафильтрующей колонки, входящей в состав перфузионного устройства, одновременно ограничивающей массобмен крупными иммунореактивными структурами и образованиями;

6. Исполнение процедуры гуморального трансмембранного инбридинга в большей мере, чем при встречном плазмообмене, позволяет в режиме обратной связи выбрать пострадавший в результате заболевания орган-мишень, подействовать на него, инициировав восстановление (реабилитацию) полноценной инкреторной активности, восстанавливая таким образом баланс в общем обмене веществ при хронической дисфункции печени, хроническом простатите и мочекаменной болезни;

7. Восстановление баланса в общем обмене веществ способом гуморального трансмембранного инбридинга более эффективно при хронической дисфункции печени и мочекаменной болезни, что подтверждает изначальное предположение об его эффективности при коррекции патологических состояний, связанных с тотальным нарушением обмена веществ неясной этиологии;

8. Исполнение способа трансмембранного гуморального инбридинга вызывает легко устранимые реакции в организме донора, что позволяет говорить о возможности клинического использования новой медицинской технологии;

9. Внедрение медицинской технологии и устройства для исполнения способа трансмембранного гуморального инбридинга в практику работы медицинских лечебных учреждений позволит не только повысить эффективность лечебных действий, расширив спектр их возможностей и нозологического применения, но и позволит повысить их экономическую эффективность.